熒光觀察所需的設備
隨著生命科學研究的進步,用于觀察處于生命狀態的細胞和蛋白質的技術也得到了發展。熒光觀察在此過程中發揮了重要作用。
該技術使用熒光染料或蛋白質作為標記來強調和投射目標區域。在特定的光(激發光)發射到物質的分子后,光能被吸收,其中的電子被激發。然后,在返回基態的過程中發出稱為熒光的光。
利用這種激發電子的現象,熒光顯微鏡在其他設備中使用光源,物鏡和熒光濾光片以使特定波長的光通過。
選擇合適的熒光濾光片對于獲得更好的圖像很重要。濾光片由激發濾光片和來自光源的特定波長的光通過,該發射濾光片使樣品發出的熒光通過。還包括分色鏡以反射特定波長的光并使不同波長的光通過以將激發光與熒光分離。
zui近,每個制造商都根據熒光試劑的特性提供了熒光濾光片組(熒光濾光片立方體),因此用戶可以根據其標本選擇合適的組合。
選擇熒光濾光片的要點
在選擇熒光濾光片組(熒光濾光片立方體)時,用戶必須使熒光染料的特性與該激發和發射濾光片的波長范圍緊密匹配。每個過濾器的特征如下:
-勵磁過濾器
根據要支持的光的波長帶的寬度,有窄帶和寬帶濾波器。基本上,頻帶越寬,您可以獲得的圖像越明亮。但是,通常使用窄帶濾波器來減少對活體樣品的損害。
-排放過濾器
這類濾波器大致分為長通(LP)濾波器,短通(SP)和帶通(BP)濾波器。LP濾鏡僅透射比特定波長更長的波長,而SP濾鏡僅透射比特定波長短的波長。BP濾鏡僅透射特定波長帶中的光。
當使用單一熒光試劑時,可以通過使用LP濾鏡獲得更明亮的圖像。另一方面,當使用幾種熒光染料時,可以通過使用不同的BP濾鏡獲得每種熒光染料的圖像。
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